HP-Diol色譜柱使用說明

色譜柱信息

HP-Diol鍵合固定相采用獨特的創新設計，以高純度具有良好機械穩定性的硅膠為基質，通過采用高純度鍵合試劑，很大限度實現單層官能團覆蓋和******的殘余硅醇基封尾，含碳量可高達8.8%。該填料為均一的球形顆粒，孔徑為80 ?和120 ?，比表面積300m2/g。1,2-二羥基丙醚鍵合相的極性特征對于極性化合物有著較強的保留。通過運用獨有的勻漿裝填技術裝填得到的HP-Diol柱柱床密度均一穩定，因此可******具有很好的柱效。HP-Diol柱一般用于多肽、蛋白和極性藥物分子等分離。此外，HP-Diol柱還可以體積排阻機理用于生物分離過程中。

穩定性和性能

HP-Diol柱使用的是被******覆蓋的鍵合硅膠填料，因此具有******的化學穩定性，特別適用于許多分析物的確認。通過嚴格控制單分子層形成以及封尾的化學反應條件，可確保柱與柱之間有著******的重現性。

右圖是對4.6 x 250 mm HP-Diol柱進行測試得到的色譜圖。

Column: HP-Diol (5μm, 120 ?, 4.6×250 mm)

Mobile phase:  Hexane: Ethanol = 80:20（v/v ）

Flow rate: 1.0 mL/min   

Column temperature: Ambient (23℃)     

Detecter (UV): 254 nm

Injection volume: 1.0 μL   

Sample: 1. Anisole

       2. Phenol

       3. 4-Nitrophenol

安全注意事項

HP-Diol柱通常在高壓下運行。如果管路連接不緊，將會導致有機溶劑和注入樣品的泄漏，從而對操作人員的健康產生影響。一旦發生泄漏，應佩戴適當的手套進行處理。另外當打開色譜柱時還應采取適當的保護措施，以防止微小的硅膠顆粒進入呼吸道。

樣品與流動相

新的HP-Diol柱中的液相是QC流動相。在儲存和運輸過程中，硅膠填料可能會干涸。這時推薦用10-20倍柱體積的純乙醇沖洗以活化色譜柱。接著可用用戶自己選擇的流動相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩定為止。如果柱壓和基線波動較大，這可能是氣泡進入了色譜柱中。這時可用較高流速沖洗色譜柱2-5分鐘，例如4.6x150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。

為了避免色譜柱的堵塞，所有樣品和溶劑，包括緩沖溶液在內，都必須在使用前用0.45mm或0.2mm的濾膜過濾。HP-Diol鍵合固定相與許多溶劑相容，包括非極性溶劑、極性有機溶劑、水、緩沖液或有機試劑與水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流動相在使用前需要脫氣。一個簡單的脫氣方法是將流動相在由水泵形成的真空下超聲5min。

色譜柱的保養

pH                   避免在pH低于2或高于9的條件下使用HP-Cyano柱。較高的pH會溶解硅膠，從而使部分或全部的氰丙基鏈從硅膠表面脫落，引起分離效率的降低和保留時間的改變。為了獲得很好的分離效果和延長柱的使用壽命，請盡量使用pH在2-8范圍內的流動相。

壓力     盡管HP-Diol柱可在高至5000psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應當低于3000psi。長時間在高壓下運行會損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來源于流速，因此流速將受制于系統所能承受的壓力。一般而言，柱壓會隨著色譜柱使用時間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預示色譜柱入口端的篩板發生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進行沖洗。

溫度     操作溫度為60 ^oC。長時間在高溫（>75^oC）下操作也會損壞色譜柱，這種情形在高的pH（>8.5）條件下特別突出。

儲藏   長期不用時，請不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時，請用至少20-30倍柱體積的50%甲醇（或乙腈）水溶液沖洗色譜柱，再用20-30倍柱體積的純有機溶劑如乙腈等進行沖洗。每根色譜柱在運輸過程中均會附有兩個可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸，請用堵頭塞緊色譜柱的兩端。

Sepax HP-Diol產品規格

 

ID x Length	Particle size	Pore size	P/N
2.1x150mm	3 mm	120 ?	116423-2115
2.1x100mm	3 mm	120 ?	116423-2110
2.1x50mm	3 mm	120 ?	116423-2105
2.1x30mm	3 mm	120 ?	116423-2103
4.6x250mm	3 mm	120 ?	116423-4625
4.6x150mm	3 mm	120 ?	116423-4615
4.6x100mm	3 mm	120 ?	116423-4610
4.6x50mm	3 mm	120 ?	116423-4605
2.1x250mm	5 mm	120 ?	116425-2125
2.1x150mm	5 mm	120 ?	116425-2115
2.1x100mm	5 mm	120 ?	116425-2110
2.1x50mm	5 mm	120 ?	116425-2105
2.1x30mm	5 mm	120 ?	116425-2103
4.6x250mm	5 mm	120 ?	116425-4625
4.6x150mm	5 mm	120 ?	116425-4615
4.6x100mm	5 mm	120 ?	116425-4610
4.6x50mm	5 mm	120 ?	116425-4605
7.8x250mm	5 mm	120 ?	116425-7825
10.0x250mm	5 mm	120 ?	116425-10025
21.2x250mm	5 mm	120 ?	116425-21225
21.2x150mm	5 mm	120 ?	116425-21215
21.2x50mm	5 mm	120 ?	116425-21205